O teste de antiglobulina direta (Direct Antiglobulin Test, DAT), também conhecido como teste de Coombs direto, é um exame laboratorial utilizado para detectar a presença de imunoglobulinas (como IgG) e/ou complemento (como C3d) na superfície das hemácias. Este teste é recomendado na identificação de processos imunomediados que levam à destruição das hemácias, como ocorre na anemia hemolítica autoimune, reações transfusionais e em algumas infecções e doenças autoimunes.
Na avaliação de hemólise, o teste ajuda a distinguir entre etiologias imunes e não imunes. Nas anemias hemolíticas autoimunes é esperado o Coombs direto positivo, mas existem cenários em que o teste pode ser negativo ou apresentar resultados atípicos, mesmo diante de forte suspeita clínica de anemia hemolítica autoimune (AHAI). Entre esses cenários, destacam-se:
- AHAI com DAT negativo: O teste de Coombs direto pode ser negativo em aproximadamente 3 a 10% dos casos de AHAI, dependendo da técnica utilizada. Métodos mais sensíveis como ELISA e citometria de fluxo podem ser necessários para detectar autoanticorpos ou complemento.
- Autoanticorpos de classe não detectada pelo reagente: A maioria dos reagentes de DAT contém anticorpos contra IgG e C3d, mas não contra IgA. Portanto, casos raros de AHAI mediada exclusivamente por IgA podem resultar em DAT negativo se não for utilizado reagente específico para IgA.
- Autoanticorpos de IgM: Em situações de hemólise mediada por IgM, como em doença das aglutininas frias ou AHAI por IgM térmica, o IgM pode se dissociar rapidamente da superfície eritrocitária antes da realização do teste, levando a DAT negativo para IgM, mas positivo para C3d devido à ativação do complemento. Em alguns casos, ambos podem ser negativos se o IgM e o complemento forem rapidamente removidos das hemácias.
- Hemólise intensa e rápida: Em hemólise aguda e intensa, como em reações transfusionais graves, as hemácias revestidas por anticorpos/complemento podem ser rapidamente removidas da circulação, resultando em DAT negativo se o teste for realizado após a depuração das células sensibilizadas.
O teste também pode estar positivo em situações sem hemólise, como doenças autoimunes (lúpus eritematoso sistémico e retocolite ulcerativa) e COVID-19.
Referências:
- Hanaoka H, Iida H, Kiyokawa T, Takakuwa Y, Kawahata K. A positive direct Coombs' test in the absence of hemolytic anemia predicts high disease activity and poor renal response in systemic lupus erythematosus. Lupus. 2018.
- Hafez W, Ziade MA, Arya A, Saleh H, Abdelrahman A. The significance of antiglobulin (Coombs) test reactivity in patients with COVID-19. Immunobiology. 2022.
- Giannadaki E, Potamianos S, Roussomoustakaki M, Kyriakou D, Fragkiadakis N, Manousos ON. Autoimmune hemolytic anemia and positive Coombs test associated with ulcerative colitis. Am J Gastroenterol. 1997.
- Berentsen S, Barcellini W. Autoimmune Hemolytic Anemias. N Engl J Med. 2021.